KmBlot 快速转膜液(20×)
KM-W-1002
500mL
室温
规格 价格
500mL ¥400

产品介绍

KmBlot Rapid Transfer Buffer(KmBlot 快速转膜液)是一种高达 20 倍浓度的高效转膜液,用于 Western Blot 湿转法转膜,能高效快速地将蛋白转移到印迹膜(PVDF或硝纤膜)上。不使用甲醇,能在 15-30 分钟内完成转膜过程。

操作步骤

1 1×快速转膜液的配制(1000 ml):取 50 ml 快速转膜液(20×)倒入烧杯中,加入 850 ml 去离子水搅拌至完全溶解,然后加入 100 ml 无水乙醇混匀。

2 做好转印三明治结构,然后转移至电泳槽中,设定恒流400 mA,电泳时间25-30分钟完成蛋白转膜。

注意事项

1. PVDF 膜使用前要用无水甲醇润湿 30 秒以上。

2. 转印电流建议设定恒流 400 mA,一般 25-30 分钟可以将 150 kD 以下蛋白完全转印;小于 100 kD 蛋白 20 分钟即可完全转印;对于大于 150 kD 蛋白,建议延长 5-10 分钟。

3. 凝胶的浓度影响转印的效率,对于胶浓度 7.5%,20 分钟即可完成转印;对于胶浓度 10%,25-30 分钟即可完成转印;对于胶浓度大于 10%,建议延长 5-10 分钟。

4. 40 分钟时间内转膜不需要放冰上,转膜槽内外都不可放冰预冷,否则会影响效率。