DNase I (RNase free)
RE127-01
1500U
-20℃
规格 价格
1500U ¥420

包 装 量:

目录编号

包装单位

RE127-01

250次

RE127-02

1000次

 

产品组成、储存、浓度:-20℃ 保存1年。浓度: 1U/μl

 

制品说明:

DNase I,即Deoxyribonuclease I,中文名称为脱氧核糖核酸酶I,是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I水解单链或双链DNA后的产物,5'端为磷酸基团,3'端为羟基。DNase I活性依赖于钙离子,并能被镁离子或二价锰离子激活。镁离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。

 

产品特点

本产品使用本公司特有的DNase和独特的反应液消化后不需要繁琐的苯酚/氯仿抽提灭活;也不需要在加热灭活前加入EDTA,避免了在RNA中引入EDTA抑制下游的反转录反应,使用起来非常快速,方便。

 

活性单位:37℃10分钟内,将能够完全降解1μg pBR322质粒DNA所需的酶量定义为1个活性单位。

来源:大肠杆菌表达的31kd重组蛋白 。

酶贮存缓冲液:50 mM Tris-HCl (pH7.5),10 mM CaCl2,50% (v/v)glycerol。

10×反应缓冲液:100 mM Tris-HCl (pH7.5 at 25℃),25 mM MgCl2,1 mM CaCl2。

纯度:不含其它DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。

 

适用范围 

制备不含DNA的RNA样品; RT-PCR反应前RNA样品中去除基因组DNA等可能的DNA污染; 体外T7, T3, SP6等RNAPolymerases催化的RNA转录后去除DNA模板;DNase I footprinting研究DNA-蛋白质相互作用;缺口平移(nick translatioin);产生DNA随机片断文库;细胞凋亡TUNEL检测中部分剪切基因组DNA作为阳性对照。

 

反应体系与条件: 

1、在RNAse free管里面加入以下成分

RNA

1μg (<8μl)

10×DNase Buffer

1μl

DNase I

1μl

RNAse free water

Up to 10μl

 

2、37℃孵育30分钟。

3、65℃孵育10分钟,灭活DNase I。

4、取适量或者全部10μl的处理过的RNA直接用于反转录荧光定量PCR。

 

 

 

注意事项

每μg RNA使用1 unit DNase I。如果RNA少于1μg,使用1 unit DNase I。如果使用RNA大于1μg,需要根据RNA的处理量按比例放大DNase I、10×DNase Buffer使用量和反应体积。