RNA酶抑制剂
RE135-01
2000U
-20 ℃保存,避免起泡,避免剧烈振荡或搅拌
规格 价格
2000U ¥360

包装量

目录编号

包装单位

RE135

2000 U

 

组成

   RE135-01

RNase Inhibitor  

50μl

 

 

产品储存-20 ℃保存,避免起泡,避免剧烈振荡或搅拌。

 

产品介绍:

本制品是经过大肠杆菌表达的重组蛋白,与RNase A形成1:1复合体,对RNase 表现高度的非竞争性抑制(Ki=3×10-10 M)。该反应是可逆的,通过尿素及疏基类试剂能够解离复合体,使RNase 复活而抑制剂不可逆失活。本品属蛋白质性质,与其它竞争性抑制剂(核酸类、无机磷酸类)不同,可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中除去。

 

活性定义抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

第一链cDNA合成(以20 μl反应体系为例)

 

1、加入

Components

Volume

Total RNA/mRNA

50 ng-5 μg/5-500 ng

Oligo(dT)18(0.5 μg /μl)or

Random Primer(0.1 μg/μl) or

GSP(Gene Specific Primer)

1 μl

1 μl

2 pmol

dNTP Mixture (10 mM each)

1 μl

5× RT Buffer

4 μl

RNase Inhibitor(40 units/μl)

0.5-1 μl

TUREscript Hˉ RTase

1 μl

RNase free H2O to final volume

20 μl

 

2、轻轻混匀

如用Oligo(dT)18或基因特异引物(GSP),42℃孵育50min。

如用Random Primer,25℃孵育10 min,42℃孵育50 min。

3、70℃加热5 min失活TUREscript Hˉ RTase。

 

RT-PCR

反转录所得的cDNA可直接用于PCR反应或储存于-20°C。